Fibrinogeenisisalduse määramine inimese plasmas vastavalt Claussi meetodile
Fibrinogeenisisalduse määramine inimese vereplasmas on üks neljast põhikatsest. Fibrinogeeni sisaldust plasmas mõõdetakse hüperfibrinogeemiaga, mis on seotud põletikuliste, immuunsüsteemi kahjustavate protsesside raskusastmega ja on samuti üks tegureid, mis suurendavad hüperviskoosi sündroomi, arteriaalse tromboosi ja elundi infarkti tekkimise riski. Fibrinogeeni kontsentratsiooni vähenemist täheldati ägeda DIC sündroomi korral, ravides fibrinolüütiliste ainetega, kaasasündinud hüpo- ja düsfibrinogeenis.
Meetodi põhimõte:
Fibrinogeenisisalduse määramine põhineb lahjendatud plasma hüübimisaja mõõtmisel trombiini liiaga. Sel juhul sõltub hüübimisaeg ainult fibrinogeeni kontsentratsioonist plasmas. Fibrinogeeni kontsentratsioon määratakse kindlaks sirgjoonega, kasutades teadaoleva fibrinogeenisisaldusega plasmat.
Komplekt sisaldab:
1. Trombiin fibrinogeeni (2 ml) määramiseks - 8 pudelit.
2. Plasma kalibraator (1 ml) - 1 pudel.
3. Kontsentreeritud imidasooli puhver (5 ml) - 1 pudel.
Reaktiivide valmistamine:
1. Tööpuhverlahus. Kontsentreerige imilasoolipuhver (5 ml) mõõtekolbi mahuga 100 ml ja lisage märgini destilleeritud veega (lahjendus 20 ml).
korda), segage hoolikalt. Tööpuhverlahuse säilitamiseks temperatuuril + 2-8 ° C mitte rohkem kui 1 kuu.
2. Trombiin fibrinogeeni määramiseks. Inimese trombiin, lüofiliseeritud aktiivsusega umbes 50 ME ml. Lisage viaali koos lüofiliseeritud trombiiniga 2 ml destilleeritud vett ja lahustage sisu ettevaatliku vananemise ajal. Reaktiiv on analüüsiks valmis 20 minutit pärast lahjendamist.
3. plasma kalibraatori lahus. 1 ml destilleeritud vett pannakse plasma-kaaliumi lahjendi viaali, lahustatakse õrnalt kiikudes. Lahus on analüüsiks valmis 20 minutit pärast lahjendamist.
Reaktiivide stabiilsus:
Komplekt on ette nähtud fibrinogeeni sisalduse kiireks kvantitatiivseks määramiseks vereplasmas (Claussi kronomeetriline meetod) koagulomeetril.
Meetodi põhimõte. See seisneb lahjendatud tsitraatplasma hüübimisaja määramises trombiini liiaga. Hüübimisaeg on sel juhul proportsionaalne fibrinogeeni kontsentratsiooniga, mis määratakse kalibreerimiskõvera abil.
30 määratluse komplekti koosseis:
1. Trombiin (lüofiliseeritud reaktiiv, 150 ühikut NIH) - 2 fl.
2. Trombiini lahusti, 3,5 ml - 1 fl.
3. Standardne plasma, millel on teadaolev fibrinogeenisisaldus (lüofiliseeritud) - 1 fl.
4. Puhver Tris-HCl (kontsentreeritud 20: 1 lahus, 1 M), 5 ml - 1 fl.
100 määratluse kohta:
1. Trombiin (lüofiliseeritud reaktiiv, 500 ühikut. NIH) - 2 fl.
2. Trombiini lahusti, 10,5 ml - 1 fl.
3. Standardne plasma, millel on teadaolev fibrinogeenisisaldus (lüofiliseeritud) - 1 fl.
4. Puhver Tris-HCl (kontsentreeritud 20: 1 lahus, 1 M), 10 ml - 1 fl.
Määramise lineaarsus on vahemikus 1,0 kuni 6,0 g / l (ilma täiendavate plasma lahjendusteta).
Fibrinogeeni kontsentratsiooni määramise tulemuste variatsioonikordaja ei ületa 10%.
Fibrinogeeni kontsentratsiooni määramine ühes plasmaproovis ühe seeria erinevate rühmadega ei ületa 10%.
Kõiki komplekti kuuluvaid reaktiive kasutatakse ainult in vitro kasutamiseks.
Kõik komplekti komponendid ei ole kasutatavates kontsentratsioonides mürgised.
Komplektiga töötamisel tuleb kanda ühekordselt kasutatavaid kummi- või plastkindaid, kuna inimese plasma proove tuleb pidada potentsiaalselt nakkusohtlikeks, mis suudavad säilitada pikka aega HIVi, B-hepatiidi viirust või muud viirusnakkuse põhjustajat.
· Mis tahes tüüpi koagulomeeter;
· Pipettige 0,1 ml - 1,0 ml dosaatorit;
· Silindri mõõtmine mahuga 200 ml;
· Kirurgilised kummikindad.
Uuringu veri võetakse kuubilisest veenist plastiliseks või silikoonitud tuubiks, mis sisaldab 3,8% naatriumtsitraadi 3 asendatud lahust (naatriumtsitraat), vere ja naatriumtsitraadi mahtude suhe on 9: 1. Vere tsentrifuugitakse kiirusel 3000-4000 p / min (1200 g) 15 minutit. Selle tulemusena saadakse trombotsüütide halb plasm, mis kantakse üle teise katseklaasi, kus seda hoitakse enne uuringut.
Tsentrifuugimine tuleb läbi viia vahetult pärast vereproovi võtmist ja uuringu plasma skriinimine tuleb läbi viia kohe pärast tsentrifuugimist. Verehüüvete, hemolüüsi, naatriumtsitraadi liia ja enam kui 2 tunni eest saadud plasma analüüs ning külmutatud vereplasma ei ole lubatud.
Enne analüüsi lahjendatakse plasma 10 korda puhvriga (0,2 ml plasma + 1,8 ml Tris-puhvrit).
1. REAKTIIVIDE VALMISTAMINE TÖÖD
Ühe viaali sisaldus kontsentreeritud Tris-HCl puhvriga viiakse mõõtesilindrisse ja ruumala täidetakse destilleeritud veega 100 või 200 ml-ni [1]. Tulemuseks on töölahuse puhver.
Ühes trombiini sisaldavas pudelis lisatakse (täpselt!) 1,5 või 5,0 ml trombiini lahustit (vt allpool joonealust märkust) ja lahustage sisu toatemperatuuril (+18 ± 25 ° C) ja loksutage tugevasti 2 minutit. Tulemuseks on trombiini lahus. Teises pudelis olev trombiin lahjendatakse vastavalt vajadusele.
Lisage standardplasmaga pudelisse (täpselt!) 1,0 ml destilleeritud vett ja lahustage sisu toatemperatuuril (+18 ± 25 ° C) ja loksutage õrnalt 3 minutit. Tulemuseks on standardplasm, mille fibrinogeeni kontsentratsioon on 2,60 g / l.
Lahjendatud standardplasm jagatakse kaheks võrdseks osaks, millest üks on külmutatud -16 ° C juures. -20 ° C (kalibreerimislahuste võimalikuks ettevalmistamiseks) ja teine lahjendatakse vastavalt alltoodud skeemile:
ja selle kasvatamine (ml)
Fibrinogeeni kontsentratsioon, g / l
0,5 ml lahust 1
0,5 ml lahust 2
0,5 ml lahust 3
Märkus: optilise mehaanilise koagulomeetri puhul ei kohaldata SOLARi ettevõtte (Valgevene) CGL 2110 lahust nr 4.
1. Lisage koagulomeetriküvetisse 0,2 ml lahust 1 (vt joonist).
2. Inkubeerige 1 minuti jooksul temperatuuril +37 ° C.
3. Lisage samas küvetis 0,1 ml trombiini tölahust, millel on toatemperatuur (+18 ± 25 ° C) ja alustage hüübimisaja arvestamist.
4. Sarnaselt määrake hüübimisaeg 2, 3 ja 4 kalibreerimislahusega.
5. Kasutades saadud andmeid, koostage kalibreerimiskõver (vt joonis), kus hüübimisaeg (id) on tähistatud ordinaatteljel ja fibrinogeeni kontsentratsioon (g / l) on joonistatud piki abstsisstelge vastavalt ettevalmistatud lahjendustele.
Joonis fig. Koordinaatvõrk ja kalibreerimiskõvera konstruktsiooni näide.
1. Koagulomeetri küvett sisaldab 0,2 ml lahjendatud (vt lõik "Analüüsitud proovide ettevalmistamine") uuritud plasmast.
2. Inkubeerige temperatuuril +37 o C 1 min.
3. Lisage samas küvetis 0,1 ml trombiini tölahust, millel on toatemperatuur (+18 ± 25 ° C) ja alustage hüübimisaja arvestamist.
Tavaliselt on uuritava lahjendatud plasma koagulatsiooniaeg 4-40 s. Vastavalt kalibreerimiskõverale leitakse fibrinogeeni kontsentratsioon proovis (vahemikus 0,7–6,0 g / l optiliste koagulomeetrite puhul ja 0,9–6,0 g / l koagulomeetrite puhul, mis töötavad mehaanilisel põhimõttel).
Firma SOLAR (Valgevene) koagulomeetri CGL 2110 puhul on mõõdetud fibrinogeeni kontsentratsioonide vahemik seoses seadme konstruktsiooniliste omadustega 1,2-5,0 g / l.
Fibrinogeeni kontsentratsiooni määramisel (plasma lahjenduses 1 + 9), mis on mõõdetud vahemiku äärmuslike väärtuste lähedal (üle 6,0 g / l või alla 0,9 g / l), on soovitatav analüüs korrata teise plasmaproovi lahjendusega (vastavalt 1+). 19 või 1 + 4). Lisaks vähendatakse või suurendatakse kalibreerimiskõvera tulemust 2 korda.
Erinevate konfiguratsioonide komplekt on ette nähtud 30 või 100 määramiseks trombiini lahuse voolukiirusel 0,1 ml 1 analüüsi kohta.
Komplekti säilitamine peaks olema +2. +8 o C kogu komplekti kõlblikkusaeg (24 kuud). Säilitamine on lubatud temperatuuril kuni +25 o C 10 päeva. Külmutamine ei ole lubatud.
Komplekti kasutusaeg ei tohi ületada 1 nädal alates selle komponentide avamisest.
Trombiini lahust saab hoida temperatuuril +2. +8 о С kuni 3 päeva; Ärge külmutage.
Pärast viaali avamist võib trombiini lahustit hoida temperatuuril +2. +8 С С kuni 1 nädal; Ärge külmutage.
Standardlahust võib pärast lahjendamist hoida toatemperatuuril +18. +25 ºC mitte rohkem kui 3 tundi või mitte rohkem kui 1 nädal temperatuuril -16 ° C. -20 o C.
Puhvri tölahust saab hoida temperatuuril +2. +8 С С kuni 1 kuu
LITERATSIOON:
Barkagan Z.S., Momot A.P. Hemostaatiliste häirete diagnoosimine ja kontrollitud ravi. - M: "Noviamed-AO", 2001. - 296 lk.
[1] vaadake võimalusi Tech-Fibrinogen testikomplekti täitmiseks
[2] Inkubeerimine termostaadi koagulomeetris
Fibrinogeeni kontsentratsiooni määramine kliinilises praktikas toimub hemostaatilise süsteemi, ägeda faasi reaktsiooni ja kardiovaskulaarsete haiguste tekkimise riski hindamiseks. Selle kontsentratsiooni võrdlusvahemik on 2,0-4,0 g / l ja on praktiliselt sõltumatu soost ja vanusest ning raskete bakteriaalsete infektsioonide korral võib vigastuste kontsentratsioon ületada 10 g / l.
Fibrinogeeni kontsentratsiooni kvantitatiivseks määramiseks kliinilistes diagnostilistes laborites on Claussi meetod kõige sobivam, tuginedes fibrinogeeni kontsentratsiooni logaritmilisele sõltuvusele lahjendatud testplasmas lg klombi moodustumise ajast pärast trombiini lisamist suure aktiivsusega plasmale.
Enne fibriini hüübimise aja registreerimist lahjendatakse uuritavat plasmat esialgu puhverlahusega 10 korda, kuna ainult kõrge trombiini aktiivsuse ja fibrinogeeni madalate kontsentratsioonide tingimustes täheldatakse kontsentratsiooni lineaarset sõltuvust fibriini moodustumise ajast. Selline vereplasma lahjendus võimaldab määrata fibrinogeeni kontsentratsiooni ligikaudu 5,0 g / l. Plasmaproovi lahjendamise etapp võib meetodi reprodutseeritavust kahjustada.
Proovi esialgse lahjenduse väljajätmine tundub kvaliteedikontrolli uuringute seisukohast asjakohane ja seda rakendatakse muudetud Claussi meetodis, mida kasutab uus MultiTech-Fibrinogeeni testisüsteem, mille on tootnud Tehnologiya-Standart. Muudetud Claussi meetod võimaldab uurida fibrinogeeni kontsentratsiooni laiemas vahemikus ja välistada proovi lahjendusastme mõju täpsusele ja reprodutseeritavusele.
Meetodit saab kasutada fibrinogeeni kontsentratsiooni määramiseks koagulomeetrites optilise, optilise mehaanilise ja mehaanilise põhimõttega, et registreerida hüübe moodustumist.
Järgnevalt on toodud testimis- ja võrdlustulemused uue testisüsteemi ja reaktiivikomplektide vahel, et määrata fibrinogeeni kontsentratsioon teistelt tootjatelt.
Meetodi põhimõte on määrata tsitraatplasma hüübimisaeg trombiini liiaga. Fibrinogeeni kontsentratsioon määratakse kalibreerimiskõveraga, mis on konstrueeritud log-log koordinaatide süsteemis.
Reagentide valmistamine tööks ja uuringute tegemiseks on toodud MultiTech-Fibrinogeeni reaktiivikomplekti juhendis.
Tulemuste hindamine: Uuritava plasma proovi hüübimisaeg on 5-100 s, sõltuvalt fibrinogeeni kontsentratsioonist ja koagulomeetri tüübist. Fibrinogeeni kontsentratsiooni määramise ulatus ilma täiendava lahjenduseta on 0,9-10,0 g / l. Kui määramise tulemused on ligikaudu 0,9 g / l või vähem (ilma hüübimistuvastuse määramata), tuleb fibrinogeeni kontsentratsioon määrata klassikalise Claussi meetodi abil, mis on kasutatud “Tech-fibrinogeeni test” reagendiga (kat. Nr. 094 või nr 324) või sarnane lahjendusega plasma 1: 5. Fibrinogeeni kontsentratsioon tervetel inimestel on vahemikus 2,0 kuni 4,0 g / l.
MultiTech-Fibrinogeeni reaktiivikomplekti võrdluskatse tulemused sarnaste komplektide ja erinevate koagulomeetritega
MultiTech-Fibrinogeeni testimissüsteemi kalibreerimine teostati koagulomeetrites erineva põhimõttega, et registreerida trombide moodustumise aega MultiTechi kalibraatorikomplektiga, mis koosnes 5 lüofiliseeritud proovist kalibreerimisplasmastest, mille fibrinogeeni kontsentratsioon oli 1,25, 2,2, 3,2, 5,5, 8,0 g / l. Erinevate instrumentide jaoks joonistatud kalibreerimiskõverad on näidatud joonisel fig. Fibrinogeeni kontsentratsiooni sõltuvus trombide moodustumise ajast log-log koordinaatide süsteemis läheneb kogu katseala ulatuses sirgele joonele.
Joonis fig. Kalibreerimiskõverad, mis on saadud mitme koagulomeetriga MultiTech-Fibrinogeeni komplektiga
Erinevate testisüsteemide võrdlus viidi läbi, kasutades kontrollplasma fibrinogeeni kontsentratsiooniga 0,6; 1, 1; 2.3; 3.4; 5,6; 8,4 g / l. Tabelis 1 on toodud andmed erinevate ettevõtete CF-määramise reaktiivikomplektide plasmas stabiilsuse kohta, kui Claussi meetodit teostati esialgse plasma lahjendusega 1:10, ja kasutades modifitseeritud meetodi kasutamisel kogu plasmat.
TÄHTIS! Modifitseeritud Claussi meetodi kasutamine võimaldab laiendada erinevat tüüpi koagulomeetrite CF usaldusväärse määramise ulatust, eriti kõrge kontsentratsiooni valdkonnas, mis nõuab proovi täiendavat lahjendamist meetodi klassikalises versioonis.
Tabel 1.
Erinevate tootjate testisüsteemide CF määramise tulemused
PG-10/1 määratud hind - 2950 rubla.
Reagentide komplekt fibrinogeenisisalduse määramiseks (Fibrinogeeni test) vastavalt TU 9398-264-05595541-2010
See on mõeldud fibrinogeeni kontsentratsiooni määramiseks vereplasmas, kasutades Claussi meetodit, mis põhineb kõikidel poolautomaatsetel ja automaatsetel koagulomeetritel.
Fibrinogeeni määramine inimese vereplasmas on üks peamisi teste hemostaasi uuringus. Katse eesmärk on mõõta fibrinogeeni sisaldust hüperfibrinogeneemias, mis on seotud põletikuliste, immuunsete, destruktiivsete protsesside raskusastmega ja on samuti üks tegureid, mis suurendavad hüperviskoosi sündroomi, arteriaalse tromboosi ja elundi infarkti, samuti ägeda DIC-i riski fibrinolüütiliste ainetega ravi ajal. kaasasündinud hüpo- ja düsfibrinogeemiaga.
Meetodi põhimõte:
10-kordse lahjendatud tsitraatplasma hüübimisaega mõõdetakse trombiini liia lisamisega. Selles süsteemis sõltub fibriini trombi moodustumise aeg ainult fibrinogeeni plasmakontsentratsioonist, mis määratakse plasma kalibraatori lahjenduste kalibreerimisgraafikuga kindlaksmääratud fibrinogeeni sisaldusega.
Komplekt sisaldab:
Üks komplekt on ette nähtud 320 analüüsi läbiviimiseks voolukiirusel 0,05 ml trombiini analüüsi kohta.
Fibrinogeeni normaalseid ja patoloogilisi väärtusi tuleb jälgida, kasutades kontrollplasma (tervete doonorite kogum) (plasma H), kood KM-1.
DDS-reaktiivid töötavad peaaegu kõigil analüsaatoritel, sõltumata hüübimistuvastuse meetodist, sealhulgas sellistest mudelitest nagu CoaLAB 1000, KoTest-4, ASKa 2-01- ASTRA, APG, Minilab, Solar, KS-4 Delta, KS-1, Destiny Plus, Destiny Max, HumaClot Junior, HumaClot DUO, HumaClot Duo Plus, Ena, Tetra, Deka, Start-4, START Max, COAG-A-MATE XM, CoaDATA 4000, KG-4, Thrombostat, OPTION 2 PLUS (OPTION 4 PLUS), AK-37, Insula-500, Clot, Clot-1, Clot-1A, Clot SP, Clot 2B, Clotty, KG-500, TS4000 Plus, MAXMAT PL COAG, Autoklot, Clot 2S, CL Analyzer, COATRON M4 COATRON M1, COATRON M2, BC1, BIOBAS, BIOBAS 1, BIOBAS 2, MS 1, MS 4 Plus, MC 10 Plus, MD 52, MD 54, MD-560, MD-560i, RT-2201C, RT-2202C, RT-2204C, Thrombotimer, CS-2000i / CS2100i, BCS XP süsteem, ACL TOP 300 CTS, ACL TOP 500 CTS, ACL TOP 700 CTS, ACL TOP 700 LAS, ACL TOP 700, Coag4D D-Dimer, MG1410, Dixion S2000, ST 2410, CA-50, CA-510, CA-560, CA-1500, CA-620, CA-650, CA-660, CGL2110, Thrombolyzer X, Thrombolyzer XR, Thrombolyzer XRM, Coasys Plus C, Ceveron -alpha, ANSO8-01- "VASMA" jne
DDS-reaktiivikomplektide kasutamisel tuleb järgida analüsaatori tehase seadeid, muuta segatud reaktiivide ja plasma mahtu ning vajadusel DDS-komplektide juhendites määratud inkubatsiooniaega.
Pakume kohandusi nõudmisel.
Tromboplastiin, sertifitseeritud MICH - 5 pudeliga (4 ml).
Tromboplastiin, sertifitseeritud MICH - 10 pudeliga (4 ml).
Tromboplastiin, sertifitseeritud MICH - 10 pudeliga (8 ml).
APTT-reaktiiv - 5 pudelit (4,0 ml).
Kaltsiumkloriidi lahus, 0,025 M - 5 pudelit (4,0 ml)
APTT-reaktiiv - 5 pudelit (10,0 ml).
Kaltsiumkloriidi lahus, 0,025 M - 5 pudelit (iga 10,0 ml)
Trombiin - 10 pudelit (2 ml).
Trombiin - 10 pudelit (4 ml).
Trombiin fibrinogeeni määramiseks - 5 pudelit (2,0 ml).
Imidasooli puhversüsteem (IHD), pH 7,45-7,55, mis sisaldab imidasooli, 0,05 M; naatriumkloriid, 0,15 M - 1 pudel (25 ml).
Vereplasma - 1 pudel (1,0 ml).
Trombiin fibrinogeeni määramiseks - 5 pudelit (4,0 ml).
Imidasooli puhversüsteem (IHD), pH 7,45-7,55, mis sisaldab imidasooli, 0,05 M; naatriumkloriid, 0,15 M - 2 pudelit (25 ml).
Vereplasma - 1 pudel (1,0 ml).
Tromboplastiin, sertifitseeritud MICH - 5 pudeliga (4 ml).
ID-kaart
Tromboplastiin, sertifitseeritud MICH - 10 pudeliga (4 ml).
ID-kaart
Tromboplastiin, sertifitseeritud MICH - 10 pudeliga (8 ml).
ID-kaart
APTT-reaktiiv - 5 pudelit (4,0 ml).
Kaltsiumkloriidi lahus, 0,025 M - 5 pudelit (4,0 ml)
ID-kaart
APTT-reaktiiv - 5 pudelit (10,0 ml).
Kaltsiumkloriidi lahus, 0,025 M - 5 pudelit (iga 10,0 ml)
ID-kaart
Trombiin - 10 pudelit (2 ml).
ID-kaart
Trombiin - 10 pudelit (4 ml).
ID-kaart
Trombiin fibrinogeeni määramiseks - 5 pudelit (2,0 ml).
Imidasooli puhversüsteem (IHD), pH 7,45-7,55, mis sisaldab imidasooli, 0,05 M; naatriumkloriid, 0,15 M - 1 pudel (25 ml).
Vereplasma - 1 pudel (1,0 ml).
ID-kaart
Trombiin fibrinogeeni määramiseks - 5 pudelit (4,0 ml).
Imidasooli puhversüsteem (IHD), pH 7,45-7,55, mis sisaldab imidasooli, 0,05 M; naatriumkloriid, 0,15 M - 2 pudelit (25 ml).
Vereplasma - 1 pudel (1,0 ml).
ID-kaart
Fibrinogeen - vere hüübimise kõige olulisem näitaja. See sünteesitakse maksas ja moodustub trombiini ekspositsiooni tulemusena. Fibrinogeeni taseme standardväärtus varieerub vahemikus 2-4 grammi ühe liitri veres. Rasedatel ja vastsündinutel on see näitaja mõnevõrra muutunud. Kõik kõrvalekalded normist näitavad keha vastavaid patoloogilisi seisundeid.
Fibrinogeen on spetsiifiline plasmavalk, mis sünteesitakse maksas. See kuulub hüübimisanalüüsi rühma. See valk on vajalik normaalseks hemostaasiks. Trombiini mõjul muutumatuks fibriiniks muutudes moodustab fibrinogeen teatud tüüpi moodustumise (trombi), mis peatab verejooksu, sulgedes kahjustatud veresoone seina oma niididega.
Huvitav Kui fibrinogeen puudub vereplasmas, see ei koaguleeri. Seda plasmat nimetatakse seerumiks.
Täiskasvanud fibrinogeeni tase on 2-4 g / l. Fibrinogeeni sisaldus naistel veres on veidi tõusnud –2-6 g / l, kõik sõltub raseduse kestusest. Vastsündinutel on see näitaja vahemikus 1,3-3 g / l.
Lisateavet fibrinogeeni kiiruse kohta rasedatel naistel nädala jooksul leiate meie portaali artiklist.
Meditsiinis nimetatakse fibrinogeeni hemostaasi või koagulatsiooni plasmafaktoriks, nii et veri võetakse ainult veenist. Patsientidel on ette nähtud vere annetamine koagulogrammi (vere hüübimise analüüs) või biokeemia (vere biokeemiline analüüs) jaoks. Mis see on? Uuring on tehtud laboris. Venoosne veri asetatakse spetsiaalsesse katseklaasi, kus on antikoagulant. Mõne aja pärast annavad laboris spetsialistid hemostaasiogrammi sõeluuringud raviarstile või patsiendile. Laboratoorsete assistentide järelduste dešifreerimiseks on vaja teada, milliseid komponente see sisaldab:
Teine võimalus fibrinogeeni määramiseks veres - uuring Klausi kohta. Lahjendatud plasmale lisatakse suur hulk trombiini ja jälgitakse hüübe teket. Seega uuritakse fibrinogeeni plasmatasemeid.
Et testitulemus oleks tõene, peate järgima teatud reegleid:
Kui biokeemilises vereanalüüsis või koagulogrammis on näidustatud suurenenud fibrinogeeni sisaldus, võib see tähendada teatud patoloogiliste seisundite olemasolu:
Fakt! Fibrinogeeni suurenemine on mõnel juhul kindlaks määratud eakate ja halva harjumusega inimeste (suitsetamine, alkohol) veres.
Fibrinogeeni kõrvalekaldeid normist positiivses suunas saab korrigeerida fibrinolitikovi, antikoagulantide, trombotsüütide vastaste ainete, vitamiinipreparaatide, millel on kõrge nikotiinhappe, A-, C-, E- jne sisaldusega. rasvasisaldusega loomse päritoluga. Fibrinogeeni vähendamiseks soovitavad arstid süüa puuvilju, köögivilju, tumedat šokolaadi, mereande, kakaod. Rahvaloetajatel soovitatakse juua aloe mahla, pojengi juurest väljapookida ja värsket Kalanchoe mahla.
See on oluline! Fibrinogeeni vereanalüüsi iseseisvalt dešifreerida ja määrata ravi ei ole seda väärt. Seda peaks tegema laboris või arst.
Fibrinogeeni vähenemine näitab sageli toitainete tasakaalustamatust või vitamiinide C ja B12 puudumist. Samuti võib väiksemast suunast kõrvalekaldumine normist rääkida maksa tsirroosist, DIC-st, mürgistustest, hepatiidist või toksemisest. Negatiivse suuna kõrvalekaldeid korrigeeritakse spetsiaalsete ravimite võtmise ja teatud toidu söömise teel: kartul, tatar, spinat, munad, pähklid, banaanid jne.
Hoida lastele kättesaamatus kohas.
Jäta oma kommentaar
Ettevõtte ametlik veebileht. Vene Interneti peamine entsüklopeedia narkootikumide ja apteegikaupade kohta. Ravimite tugiraamat Rlsnet.ru pakub kasutajatele juurdepääsu ravimite, toidulisandite, meditsiiniseadmete, meditsiiniseadmete ja muude kaupade juhenditele, hindadele ja kirjeldustele. Farmakoloogiline võrdlusraamat sisaldab teavet vabanemise koostise ja vormi, farmakoloogilise toime, näidustuste, vastunäidustuste, kõrvaltoimete, ravimite koostoime, ravimite kasutamise meetodi, ravimifirmade kohta. Ravimikiri sisaldab ravimite ja kaupade hindu Moskvas ja teistes Venemaa linnades.
Teabe edastamine, kopeerimine, levitamine on keelatud ilma LLC RLS-Patendi loata.
Kui viidatakse veebilehel www.rlsnet.ru avaldatud teabematerjalidele, on vaja viidata teabeallikale.
Paljud huvitavamad
© VENEMAA RAVIMITE REGISTREERIMINE ® Radar ®, 2000-2019.
Kõik õigused kaitstud.
Materjalide kaubanduslik kasutamine ei ole lubatud.
Teave on mõeldud meditsiinitöötajatele.
AINULT VITRODIAGNOSTIKAS
reaktiivikomplekti kasutamise kohta
protrombiini aeg ja fibrinogeeni kontsentratsioon
Quick-Fg-testikomplekt on mõeldud samaaegselt hemostaatilise süsteemi - protrombiiniaja ja fibrinogeeni kontsentratsiooni - uuringu läbiviimiseks. Protrombiini aja määratlust kasutatakse II hüübimisfaktorite (protrombiin), V, VII, X testimiseks ja kaudsete antikoagulantide ravi jälgimiseks. Fibrinogeeni kontsentratsiooni määramist kasutatakse selle valgu omandatud puuduse diagnoosimiseks (DIC, raske maksahaigus, ravi fibrinolüütikumidega), samuti kaasasündinud a / hüpo / düsfibrinogeemia. Fibrinogeeni kontsentratsiooni suurenemist täheldatakse ka nakkushaiguste, pahaloomuliste kasvajate, krooniliste põletikuliste protsesside puhul raseduse ajal.
Meetodi põhimõte. Tromboplastiin (faktor III, trombokinaas) muudab vereplasma protrombiini kaltsiumiioonide manulusel aktiivseks ensüümiks trombiiniks, mis muundab fibrinogeeni plasmas lahustumatuks fibriiniks. Mõõdetud protrombiiniaeg - fibriini moodustumise aeg vereplasmas lisatud kaltsiumioonide ja koe tromboplastiini (inimese aju ekstrakt) juuresolekul. Pärast trombi kiiret dehüdratsiooni (filtripaberile pressimise teel) mõõdetakse moodustunud fibriini mass, millest arvutatakse fibrinogeeni kontsentratsioon plasmas.
1. Tromboplastiin (lüofiliseeritud), 1 g - 2 fl. Reagen testis hepatiiti ja HIV-i.
2. Kaltsiumkloriid (kontsentreeritud 20: 1 lahus, 5,54%), 20 ml - 3 fl.
3. Puhver Tris-HCl (kontsentreeritud 20: 1 lahus, 1 M), 10 ml - 2 fl.
KOMPLEKTI ANALÜÜSILISED OMADUSED
Protrombiini aeg on lineaarne vahemikus 14 kuni 120 s ja fibrinogeeni kontsentratsioon vahemikus 1 kuni 8 g / l.
Protrombiini aja määramise tulemuste variatsioonikordaja ei ületa 6% ja fibrinogeeni kontsentratsiooni määramisel - 10%.
Protrombiini aja ja fibrinogeeni kontsentratsiooni määramise tulemuste lubatud erinevus ühes vereplasma ühes seerias ei ületa 10%.
Kõiki komplekti kuuluvaid reaktiive kasutatakse ainult in vitro kasutamiseks.
Kõik komplekti komponendid ei ole kasutatavates kontsentratsioonides mürgised.
Komplektiga töötamisel tuleb kanda ühekordselt kasutatavaid kummi- või plastkindaid, kuna inimese plasma proove tuleb pidada potentsiaalselt nakkusohtlikeks, mis suudavad säilitada pikka aega HIVi, B-hepatiidi viirust või muud viirusnakkuse põhjustajat.
SEADMED, MATERJALID, REAGENDID
- termiline vann 37 ° C juures; väändemassid;
- laboratoorsed tsentrifuugid; stopper;
- pipetid mahuga 0,1 ml; 0,2 ml; 5,0 ml;
- klaasist torud; mõõtesilinder mahuga 200 ml;
- portselanmört, mis on varras; destilleeritud vesi;
- filterpaber; Kirurgilised kummikindad.
ANALÜÜSITAVATE PROOVIDE ETTEVALMISTAMINE
Uuringu veri võetakse kuubilisest veenist plastiliseks või silikoonitud tuubiks, mis sisaldab 3,8% naatriumtsitraadi 3 asendatud lahust (naatriumtsitraat), vere ja naatriumtsitraadi mahtude suhe on 9: 1. Vere tsentrifuugitakse kiirusel 3000-4000 p / min (1200 g) 15 minutit. Selle tulemusena saadakse trombotsüütide halb plasm, mis kantakse üle teise katseklaasi, kus seda hoitakse enne uuringut.
Tsentrifuugimine tuleb läbi viia vahetult pärast vereproovi võtmist ja uuringu plasma skriinimine tuleb läbi viia kohe pärast tsentrifuugimist. Verehüüvete, hemolüüsi ja rohkem kui 2 tundi tagasi saadud plasma ning külmutatud vereplasma analüüs ei ole lubatud.
REAGENTIDE VALMISTAMINE JA ANALÜÜSI TEGEMINE
1. REAKTIIVIDE VALMISTAMINE TÖÖD
A. Kontsentreeritud puhvri lahjendamine
Ühe viaali sisu viiakse Tris-HCl kontsentreeritud puhvriga mõõtesilindrisse ja viiakse destilleeritud veega maht 200 ml-ni. Tulemuseks on töölahuse puhver.
B. Tromboplastiini suspensiooni valmistamine
Osa kuivast tromboplastiinist (50 mg) pannakse portselanmördisse, lisatakse 1,0 ml töölahuse puhvrit ja hõõrutakse ettevaatlikult 2 minutit. Seejärel lisage mördile 4,0 ml töövahetuslahust, segage pintsliga ja tsentrifuugige suspensiooni 1000 p / min (240 g) 5 minutit. Supernatant (tromboplastiini suspensioon) tühjendatakse ja seda kasutatakse analüüsiks. Saadud tromboplastiini suspensiooni võib kasutada 1 päeva säilitustingimustes toatemperatuuril (+18 + 25 ° C) ja 2 päeva temperatuuril +2 ° C. + 8 ° C
B. Fibrinogeeni kontsentratsiooni määramiseks kasutage kontsentreeritud (5,54%) kaltsiumkloriidi lahust.
G. Kaltsiumkloriidi töölahuse valmistamine (protrombiini aja määramiseks).
Et määrata protrombiiniaeg uuringu päeval vastavalt vajadusele, lahjendage kontsentreeritud kaltsiumkloriidi lahus 20 korda destilleeritud veega (1 maht kontsentreeritud lahust + 19 mahuosa vett), saadakse kaltsiumkloriidi tölahus (0,277%).
2. ANALÜÜSI KASUTAMINE
2.1. Kiire protrombiini aja määratlemine
Segu, mis sisaldab võrdsetes kogustes 0,277% kaltsiumkloriidi lahust ja tromboplastiini suspensiooni, segatakse eelnevalt kokku. Kuumutage segu veevannis temperatuuril + 37 ° C 15-20 minutit. Tulemuseks on tromboplastiin-kaltsiumi segu (TKS).
Kontroll (normaalsete) näitajate määramine
1. Koagulomeetriküvetis või katseklaasis (kui käsitsi määratud) lisatakse trombotsüütide vaesusele 0,1 ml kontroll-normaalset plasmat [1].
2. Inkubeerige temperatuuril + 37 ° C 1 minut.
3. Lisage 0,2 ml TCS-i, mille temperatuur on + 37 ° C, ja alustama hüübimisaja arvestamist kuni fibriini moodustumiseni.
Samamoodi määrake patsientide plasma proovides protrombiini aeg.
Normaalses plasmas on protrombiiniaeg 14-17 s.
2.2. Fibrinogeeni kontsentratsiooni määramine
1. Katseklaasis segatakse järjestikku 1,0 ml uuritud vereplasma, 0,1 ml tromboplastiini suspensiooni ja 0,1 ml kaltsiumkloriidi kontsentreeritud lahust (5,54%).
2. Loksutage toru ja asetage veevanni temperatuuril + 37 ° C.
3. 10 minuti pärast kandke moodustunud tromb filtreerima paberit ja kuivatage see survestades ja liigutades trombi läbi filtri. Kuivatamine toimub enne filtri niiskuse kadumist.
4. Hoidke fibriini hüübimist vabas õhus toatemperatuuril (+18. + 25 ° C) 15-20 minutit ja kaaluge väändemassile.
Tavaliselt on 1,0 ml vereplasmast saadud trombi mass 10-20 mg. Fibrinogeeni sisaldust g / l leitakse kuiva fibriini massi korrutamisel teguriga 0,2.
Fibrinogeeni normaalne plasmakontsentratsioon on 2,0-4,0 g / l.
SÄILITAMISE JA KOHALDAMISE TINGIMUSED
Komplekt on mõeldud samaaegseks 400 testiks protrombiini aja ja fibrinogeeni kontsentratsiooni määramiseks, reaktiivi tarbimine 0,1 ml ühe analüüsi kohta.
Komplekti säilitamine peaks olema +2. + 8 ° C kogu komplekti kõlblikkusaeg (18 kuud). Lubatud on hoida temperatuuril kuni + 25 ° C 10 päeva. Külmutamine ei ole lubatud.
Komplekti kasutamise aeg ei tohi ületada 2 kuud. alates selle komponentide avamisest.
Pärast pudeli avamist võib lüofiliseeritud tromboplastiini säilitada temperatuuril +2. + 8 ° C kuni 1 kuu.
Tromboplastiini suspensiooni võib hoida toatemperatuuril (+18… 25 ° C) mitte üle 1 päeva või mitte üle 2 päeva temperatuuril +2. + 8 ° C, mitte külmutada.
Tromboplastiin-kaltsiumi segu võib hoida toatemperatuuril mitte rohkem kui 8 tundi ja temperatuuril + 37 ° C - mitte rohkem kui 3 tundi.
Puhvri tölahust saab hoida temperatuuril +2. +8 ° C mitte rohkem kui 1 kuu.
Kaltsiumkloriidi kontsentreeritud lahust võib hoida temperatuuril +2. +8 ° C kuni 2 kuud, kui pudel on suletud.
Kaltsiumkloriidi tölahust võib hoida toatemperatuuril mitte üle 1 päeva või mitte üle 2 päeva temperatuuril +2. + 8 ° C
[1] Võib kasutada firma "Technology-Standard" RNP-plasmat.
Fibrinogen // TriniCLOT Fibrinogen Kit.
Komplekt koosneb: trombiinist, imidasoolpuhvrist, kalibreerimisplasmast (Tcoag, Iirimaa)
Kliiniline tähtsus
Fibrinogeen on lahustuv valk, fibriini prekursor, mis esineb vereplasmas. Fibrinogeeni vere hüübimise lõppetapis trombiini mõju all moodustub lahustumatu valgu fibriin. Kaasasündinud afibrinogeemia, hüpofibrinogeemia, düsfibrinogeneemia korral võib täheldada fibrinogeeni vähenenud taset. Fibrinogeeni tasemed on samuti vähenenud paljudes haigustes, nagu näiteks levinud intravaskulaarne koagulatsioon, süsteemne fibrinolüüs, pankreatiit ja raske maksapuudulikkus. Fibrinogeen on akuutse faasi valk, mille kontsentratsioon suureneb põletiku, infektsiooni, raseduse ja vigastuse järel. Samuti on see suitsetajates kõrgenenud. Fibrinogeeni kõrged tasemed on samuti seotud tromboosieelsete seisunditega. Fibrinogeeni tase korreleerub positiivselt aterosklerootiliste kardiovaskulaarsete haiguste, müokardiinfarkti juhtumitega.
Kindlaksmääramise põhimõte
Fibrinogeeni määramine põhineb hästi teadaoleval Claussi meetodil, mille kohaselt mõõdetakse fibrinogeeni konversiooni kiirust fibriiniks ülemäärase trombiini tingimustes. See meetod on kiire, tundlik ja täpne. Lahjendatud plasma ja trombiini liia kasutamisel on fibrinogeeni kontsentratsioon proovis pöördvõrdeline hüübimisajaga. Kalibreerimise sõltuvuse loomiseks valmistatakse võrdlusplasma lahjendused.
Toote omadused